Подобряване на доставката на RDEB генна терапия

Изследователите са използвали клетки, отгледани в лабораторията, за да започнат да правят своята нова генна терапия.
Тяхната цел е да могат да направят генната терапия по-ефективна и в по-големи количества и те съобщават, че първоначалните им експерименти показват, че това е възможно.

Водещ изследовател:

Д-р Анхелес Менсия има повече от 20 години опит в молекулярната диагностика на редки заболявания, като участва в проектирането, валидирането и превода на диагностични инструменти, базирани на следващо поколение секвениране, включително панели за диагностициране на булозна епидермолиза. Тя има богат опит в разработването на молекулярни инструменти за редактиране на гени, които се прехвърлят в клиниката.

Съизследователи:

Д-р Силвия Гомес-Себастиан е доцент във факултета по медицина на Автономния университет в Мадрид. Тя има повече от 20 години опит в генетичната манипулация на вируси, работейки с херпесвируси през ранните си години като изследовател. Тя е работила с HSV-1 ампликонови вектори, носещи пълния локус на FRDA, за възстановяване на фратаксин (FA) в клетките на пациента с атаксия на Friedreich.

Д-р Rodolfo Murillas е старши учен в CIEMAT с богат опит в областта на кожната биология, включително епидермална трансгенеза, разработването на вирусни вектори за генна терапия на кожата и разработването на експериментални протоколи за корекция на дистрофична булозна епидермолиза чрез ген редактиране.

Д-р Мирентсу Сантос е старши учен в CIEMAT с богат опит в клетъчните култури, първичните култури, молекулярната и клетъчната биология, клетъчния цикъл и сигналните пътища.

Д-р Марта Гарсия е професор по тъканно инженерство в Universidad Carlos III de Madrid UC3M. Д-р Гарсия има дългогодишен интерес към молекулярното изследване на генодерматозата и е признат експерт в разработването на модели на хуманизирана кожа за редки дерматологични заболявания.

Даяна де Прадо е аспирантка, която работи върху своята докторска степен под ръководството на д-р Менсия и Мурилас, започвайки през 2023 г.

„Напредъкът в генните терапии за RDEB през последните години ни позволява да предвидим лечения, които са ефективни и лесни за локално приложение, но с потенциал за значително подобряване на живота на пациентите.

Успешното генно редактиране с помощта на тези вектори отваря възможността за лечение на други видове EB, като доминиращ EBS или EBD, с алел-специфични CRISPR/Cas инструменти за елиминиране на експресията на патогенни алели.

– Д-р Анхелес Менсия

Заглавие на безвъзмездната помощ: Нова платформа за генериране на по-безопасни вектори, базирани на псевдобяс херпесвирус за RDEB терапия.

Генната терапия се очертава като потенциално лечебно лечение за рецесивен дистрофичен ЕБ (RDEB) чрез различни стратегии за коригиране на мутации. Вирусните вектори са лабораторни инструменти, които се използват за транспортиране на това, което е необходимо за коригиране на мутации или за транспортиране на здрави гени, които помагат за възстановяване на засегнатия протеин. Тези лабораторни инструменти обикновено идват от различни вируси, като аденовируси или херпесен вирус.

Преди това нашата група демонстрира, че получените от аденовирус вектори са полезни за възстановяване на колаген VII и възстановяване на адхезията между дермата и епидермиса in vivo. В допълнение, новите постижения в дизайна на вирусни вектори ще позволят напредък към по-обширно и ефективно лечение на RDEB кожата. Векторите, получени от вируса на херпес, имат голям потенциал за EB генна терапия, предвид естествената им способност да инфектират кожата. Скорошно клинично изпитване използва вектор на вируса на херпес симплекс (HSV-1), за да достави функционална версия на гена COL7A1 в рани на хора с RDEB. Резултатите показват значително подобрение в заздравяването на рани и повишена устойчивост срещу образуване на мехури. Тези обещаващи резултати потвърждават потенциала на получените от херпесвирус вектори за терапия с RDEB.
В тази връзка нашият екип разработва нова векторна платформа, базирана на вируса на псевдобяс по свинете (семейство Herpesviridae), който има някои предимства пред HSV-1, тъй като е по-безопасен и по-лесен за производство в големи количества. Въз основа на тази нова платформа предлагаме да генерираме вектори за RDEB, сравними с тези, които в момента се тестват в клинични изпитвания, с потенциал за по-дълготрайна корекция след локално приложение.

Нашият екип работи усилено, за да разработи ефективни и лесни за администриране локални лечения, които биха могли да революционизират подхода към лечението на RDEB. За разлика от традиционните методи за терапия с генно присаждане, които включват инвазивни и болезнени хирургични процедури, нашият подход е фокусиран върху локални генни терапии, насочени към подобряване на зарастването на хронични рани и лезии, които не могат да бъдат лекувани с кожни присадки. Нашата лаборатория е пионер в разработването на инструменти за молекулярно редактиране на гени за корекция на RDEB мутации с потенциал за постигане на трайни подобрения. Наскоро ние успешно възстановихме колаген VII и адхезията между дермата и епидермиса в предклинични модели.

В момента разработваме нови видове вектори за тази цел, по-специално тези, получени от херпес-подобни вируси, които имат силна естествена способност да инфектират кожата и следователно могат да бъдат много ефективни при лечението на хронични рани при хора с RDEB. Обещаващите резултати от последните клинични изпитвания в Съединените щати, базирани на подходи, подобни на този, който предлагаме, ни дават увереност, че се движим в правилната посока. Тази линия на изследване представлява чудесна възможност за напредък в лечението на RDEB и ние се ангажираме да продължим работата си с ентусиазъм и строгост.

Нашата цел е да дадем надежда на страдащите от това заболяване и да подобрим качеството им на живот. Заедно можем да вървим към по-светло и по-обещаващо бъдеще за онези, които се борят с RDEB.

Нови вектори, получени от херпесвирус, имат голямо обещание за лечение на епидермолиза, предлагайки потенциален лек за това изтощително състояние на кожата. За да бъдат тези лечения жизнеспособни за клинична употреба, от решаващо значение е тези вектори да се произвеждат в големи количества. Ампликоновите вектори, подклас от вектори, получени от херпес, представляват по-безопасна алтернатива, тъй като им липсват вирусни гени. Процесът на тяхното производство обаче се усложнява от необходимостта от съвместно производство с помощни херпесни вируси.

Нашият проект предлага иновативна производствена платформа, предназначена да подобри добива на терапевтични вектори, като по този начин оптимизира качеството на крайните препарати. В началната фаза ние модифицирахме клетките продуценти на PK15, за да произведем преференциално желания вектор чрез елиминиране на помощни вируси. Този подход успешно измести съотношението вектор/помощник в полза на терапевтичния вектор, служейки като доказателство за концепцията за тази производствена стратегия и демонстрирайки ефикасността на нашия дизайн. Продължавайки напред, ние избираме конкретни клетъчни клонинги, за да усъвършенстваме и подобрим производствената платформа. Очаква се клонова популация да подобри значително инактивирането на помощни вектори, като по този начин увеличи производството на терапевтични вектори.

Тази работа, станала възможна благодарение на щедрото финансиране от DEBRA UK, е не само значителен напредък в векторното производство, но и критична стъпка към разработването на усъвършенствани терапевтични възможности. Предлага надежда и по-светло бъдеще за пациентите, страдащи от епидермолиза, като предвещава нови лечения и подобрено качество на живот. От доклада за напредъка за 2024 г.